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什么是多肽定制

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什么是多肽定制

發布日期:2019-11-02 作者:江蘇吉泰肽業科技有限公司 點擊:

多肽在-20°C很穩定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空=氣之前,冷凍干燥多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少,當無法冷凍干燥時,方法是以小的工作樣量存放。
對于多肽,脫氧緩沖劑對其溶解必不可少,因為這種多肽合成可易空氣氧化,在封瓶前,慢慢流過多肽的氮氣或氬氣也會降低氧化作用。含GIn或多肽也杏易降解,所有這些隊與不含這些自問題解有的那些隊淚比,生命期有限。多隊的溶解性
大多數肽的首先溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽,需要DMF、脲來溶解,這些溶劑可能其些實驗有副作用。所以我們建議設計多肽時要加注意.殘基將全增加多肽的溶解難度。

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您需要特殊的多肽或任何技術幫助,請隨時與我們聯系。我們包你完全滿意,對于我們不能適當合成的順序,我們不收費。多肽的保存和操作
包裝1mg或更少的多肽按凈重包裝,聲明的小瓶重不含相關抗離子和水。例如,氨基酸分析決定的肽含量是80%,在1mg樣品中,那么瓶中毛重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。標出的重量含相關抗離子和水,樣品中肽百分比為90%。
不要把肽含量和純度摘混了。肽的純度可能是100%,而肽含量相關帶電基團的抗離子量和肽親水性決定。這是合成肽的本身特性。凍干肽的保存所有產品應存于冰箱。多數肽以此方法可以存放幾年不變。肽溶液的保存
溶液肽遠比凍干形式不穩定。溶液應為中性保存的。為避免樣品的反復凍融,最好分成小樣存放。一份樣品融東后未用完。細菌降解有時會成為溶液肽的麻煩,為克服此,肽應溶于無菌水,或肽溶液用0.2μM濾膜過濾。多肽的重建和操作
多數肽溶于無菌蒸溜水。初次溶解時,要注意使初始濃度比要求濃度大,如果多肽僅有限溶解性,這便允許加入其它溶解劑或緩沖鹽。如果多肽在水中的溶解性有限,有幾種選擇可幫助溶解:對堿性肽用稀乙酸酸性肽用稀氨水對極疏水的肽用10%有機修飾物極不溶的肽用DM50或DMF
瞬的濃溶液也很有用,與上述方法合用,聲處理也是溶解多肽的有效手段。多肽應用和保存
多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問題是形成二級結構。除了最太肽外,這點都會發生,在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會促進二級結構形成。我們建議先在無菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。如需要增加溶解率,可用聲處理。溶解仍有問題,加少量稀乙酸(10%)或氨水,會便于溶解。
要長期保存多肽,冷凍干燥,冷干粉可在-20C或更低存放幾年而很少或無降解。溶液中的多肽遠不穩定。多肽易受細菌降解,應用無菌純化水溶解。
含有殘基的多肽溶液由于氧化,壽命有限。應溶于無氧溶劑,為防止重復凍融的破壞,建議溶解過量的肽的便實驗,其余多肽以固體形成保存。HPLC分析和純化
分析HPLC使用柱子和泵系統,可以經受傳遞高壓,這樣可以用極細的微粒(3-10μ m)做填料。由此多肽要在幾分鐘內高度被分析。
HPLC分兩類:離子父換和反怕。離子必換HPLC依靠多 臥和回相間的直接電荷相互作用。杜子在一定PH范圍帶 自特定電荷衍變成一種離子體,而多肽或多隊混臺物,出其氨基酸組成表現出相反電荷。分離是一種電荷相互作用,通過可變PH, 離子強度,或兩者洗脫出多肽,通常,先用低離子強度的溶液,以后逐漸加強或一步-步加強,直到多肽火柱中洗脫出,離子交換分離的-一個例子使用強陽離子交換柱。如通過酸性PH中帶正電來分離.
反相HPLC條件與正常層析正相反。多肽通過疏水作用連到柱上,用降低離子強度洗脫,如增加洗脫劑的疏水性。通常柱子由共價吸附到硅上的碳氫烷鏈構成,這種鏈長度為G4-G8碳原子。由于洗脫是一 種疏水作用。長鏈柱比短鏈對小的,高帶電肽好。另一方面大的疏水肽用短鏈柱洗脫好。然而,總體實踐中,這兩類柱互變無多少顯著差別,別類載體由碳水化合物構成,比如苯基。
典型的操作常由兩綬沖劑組成,用線型梯變以每分鐘0.5%到1.0%改變的速度混合。
大量各種緩沖劑含許多不同試劑,這樣許多不同組合可形成緩沖劑,但要注意一點:硅反相柱料不能長時間暴露于高pH,甚至微堿pH,因為這樣會破壞柱子。

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