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多肽定制藥物如何做結構確證研究

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多肽定制藥物如何做結構確證研究

發布日期:2018-07-28 作者:江蘇吉泰肽業科技有限公司 點擊:

多肽定制藥物如何做結構確證研究

多肽結構研究的主要目的是要說明其氨基酸組成和序列是否正確。多肽分子中如有半胱氨酸,應明確其狀態(氧化態或還原態),對含有多個半胱氨酸的多肽,應明確二硫鍵的正確連接位點。對于某些長肽,可能還需要采用核磁共振、園二色譜等方法對其空間結構(例如二級、三級結構)進行研究。

對于短肽,采用元素分析、紅外光譜、核磁共振譜、氨基酸組成分析、質譜等常見方法,有時就足以說明其結構特征。如果上述測試取得的信息難以進行合理解析和歸屬,應進行氨基酸序列測定。

對于中、長肽應進行氨基酸組成和氨基酸序列分析。闡明氨基酸序列的通用方法是Edman降解,這種方法是測定N端氨基酸的一種化學方法;基于多種技術的質譜,如快原子轟擊、電噴霧、場解析和激光解析質譜,可提供多肽的分子量及其序列信息,是對Edman降解的很好補充。

中、長肽的結構研究中,盡管紫外光譜、紅外光譜、核磁共振譜等能夠提供的可供分析的信息有限,但在一些情況下,上述研究還應考慮進行。例如,在可獲得結構確證對照品時,進行上述譜圖的對比測定,對于說明所研制產品的結構有重要意義;對于全新結構的多肽,進行上述研究,也可為說明多肽結構提供輔助信息,并為質量研究和質量標準的制訂提供信息。

對于含有20個以上氨基酸殘基的多肽,如不能直接確定其序列,可根據多肽分子量大小及氨基酸組成特點,使用專一性較強的蛋白水解酶(一般為肽鏈內切酶)將多肽裂解成小片段,再分析各小片段的序列。

當多肽中含有非天然氨基酸及氨基酸衍生物時,結構研究中應予以證明。此時,應在相應的研究中,考察這些非天然氨基酸及氨基酸衍生物的色譜行為。


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